AVALIAÇÃO DE PROTEINAS PURIFICADAS DE ANGIOSTRONGYLUS VASORUM NO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DE ANGIOSTRONGILOSE CANINA
Autor(es): VIVIANE DE OLIVEIRA VASCONCELOS, LUIZ GUILHERME DIAS HENEINE, RICARDO WAGNER DE ALMEIDA VITOR, WALTER DOS SANTOS LIMA
AVALIAÇÃO DE PROTEINAS PURIFICADAS DE ANGIOSTRONGYLUS VASORUM NO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DE ANGIOSTRONGILOSE CANINA
» Área de pesquisa: HELMINTOLOGIA
» Instituição: UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS
» Agência de fomento e patrocinadores: CNPq e FUNDAÇÃO EZEQUIEL DIAS (FUNED)
Angiostrongylus vasorum é um nematódeo encontrado no sistema circulatório de cães domésticos e canídeos silvestres que apresentam diversas manifestações clínicas podendo levar o animal ao óbito. Os testes padronizados para o diagnóstico da angiostrongilose utilizando antígeno bruto podem apresentar elevada frequência de resultados falso-positivos. Dessa forma, a purificação de proteínas especifica desse parasito é de grande importância para obter maiores índices de sensibilidade e especificidade nos testes de diagnóstico. Foram utilizadas amostras de soros de 20 cães infectados experimentalmente com 100 larvas de terceiro estádio (L3) por kg/pc e amostras de soros de 60 cães infectados naturalmente por outros helmintos gastrointestinais. A purificação de proteínas especifica de A. vasorum foi realizada em duas etapas: 1ª: purificação de anticorpos policlonais (PcAbs) IgG específicos contra A. vasorum em cromatografia de imunoafinidade, 2ª: estes PcAbs foram utilizados para a purificação das proteínas especificas do parasito em cromatografia de imunoafinidade ligados a coluna de Proteína A. A análise eletroforética das proteínas purificadas de parasito adulto revelou uma banda de peso molecular de aproximadamente 51 kDa. Através do ELISA, verificou-se que essa proteína aumenta significativamente os níveis de IgG a partir do 15º dia, após a infecção, e acompanha o avanço da doença. Não se verificou reatividade cruzada quanto testada com soro de cães infectados por outros helmintos, obtendo-se 100 % de sensibilidade e especificidade. A proteína de 51 kDa mostrou-se promissora no teste de ELISA. Assim, torna-se necessário a realização novos testes imunológicos utilizando essa proteína para a pesquisa de anticorpos IgM, IgA e IgE e a caracterização da sequência de aminoácidos .
