Sistemas de cultivo in vitro de patógenos em linhagens celulares, têm tido aplicabilidade para vários estudos, tais como análises morfológicas, genéticas, proteômicas, incluindo genômica transcricional e expressões protéicas, permitindo a compreensão da interação patógeno/vetor. O presente estudo teve como objetivo verificar se as células embrionárias de R. sanguineus são bons substratos para o cultivo de patógenos, alguns deles comprovadamente transmitidos por carrapatos, outros com transmissão incerta ou ainda por outros vetores. Duas espécies de tripanossomatídeos, Trypanosoma cruzi (CBT 118-isolado obtido de triatomineo no estado do Piauí) e Leishmania infantum chagasi (CBT153-isolado obtido de cão no estado do Maranhão) foram utilizadas nos experimentos. Além destes, as células embrionárias de R. sanguineus foram infectadas com Ehrlichia canis (cepa Jaboticabal, mantida em meio DH82). As amostras de células infectadas foram processadas individualmente à extração de DNA, utilizando-se o kit de extração “Dneasy Tissue Kit” (Qiagen, Chatsworth, CA), conforme instruções do fabricante. Os materiais obtidos da extração foram testados para presença de DNA, através de um protocolo de PCR em tempo real. Apenas para E. canis, as células de R. sanguineus mostraram-se eficientes como substrato para crescimento desse patógeno. |