DETECÇÃO DE DNA DE PROTOZOÁRIOS DO FILO APICOMPLEXA EM CORAÇÕES OVINOS COLETADOS EM FRIGORIFICO.
Autor(es): LUIZA PIRES PORTELLA, FERNANDA SILVEIRA FLORES VOGEL, LARISSA PICADA BRUM, GIOVANA CAMILLO, RAIZA CHEMERIS, MARTA ELENA MACHADO ALVES, LUIS ANTONIO SANGIONI
DETECçãO DE DNA DE PROTOZOáRIOS DO FILO APICOMPLEXA EM CORAçõES OVINOS COLETADOS EM FRIGORIFICO.
» Área de pesquisa: PROTOZOOLOGIA
» Instituição: UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA
» Agência de fomento e patrocinadores:
Os protozoários do gênero Sarcocystis spp. são encontrados na forma de cistos parasitando a musculatura estriada de diversos mamíferos domésticos. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi de avaliar a frequência de infecção de ovinos com este protozoário. Foram coletadas amostras de 80 corações ovinos, estes foram avaliados visualmente e coletadas amostras que foram individualmente identificadas, acondicionadas em sacos plásticos e mantidas refrigeradas até o processamento. Para detecção do cistos no tecido, as amostras foram submetidas a exame direto, onde cada secção de tecido muscular cardíaco foi pesado para obter uma alíquota padrão de aproximadamente 5 gramas. Para verificar a presenças de Sarcocystis spp. as amostras foram escarificadas e maceradas individualmente com lâmina de bisturi em placa de Petri. Posteriormente foram adicionados 15 mL de PBS 1X e homogeneizadas, a mistura foi filtrada com auxílio de uma gaze. A solução coletada em uma placa de Petri e observada em microscópio invertido com aumento de 10X. As amostras que continham cistos ou bradizoítos livres foram classificadas como positivas e aquelas sem a presença de sarcocistos e bradizoítos livres como negativas. A partir destas amostras também extraiu-se DNA para avaliação molecular destas amostras através do kit wizard genomics DNA purificaton (Promega), e após a amplificação do material genético foi realizada com iniciadores específicos para os protozoários Sarcocystis spp., Neospora caninum e Toxoplasma gondii. Os resultados do exame direto realizado nas amostras demonstrou a presença de cistos em 61 corações. Quanto a analise molecular 17/80 apresentaram amplificações para o protozoário Sarcocystis spp, 12/80 apresentaram amplificações para o protozoário Toxoplasma gondii e nenhuma amplificação foi observada para o protozoário Neospora caninum. Sendo que todas as amostras que amplificaram fragmentos de DNA também foram positivas para o exame direto. Estes resultados demonstram a importância de medidas de controle destes protozoários nos rebanhos ovinos do Estado.
