COMPARAÇÃO ENTRE PBS E RPMI-1640 PARA AVALIAÇÃO DA OVOPOSIÇÃO DE ANCYLOSTOMA CEYLANICUM
Autor(es): Vivian Jordania da Silva, Luciana Ribeiro Serafim, Thalita Tatiana Guimarães Teixeira, João Marx Salgado, Luis Fernando Viana Furtado, Maria da Gloria Quintão e Silva, Élida Mara Leite Rabelo
COMPARAÇÃO ENTRE PBS E RPMI-1640 PARA AVALIAÇÃO DA OVOPOSIÇÃO DE ANCYLOSTOMA CEYLANICUM
» Área de pesquisa: HELMINTOLOGIA
» Instituição: Centro Universitário UNA
» Agência de fomento e patrocinadores: FAPEMIG
Vários estudos sobre ancilostomose envolvendo resposta imune, patogenia e condição nutricional do hospedeiro utilizam hamsters como modelo de infecção. Para avaliação de parâmetros parasitológicos se faz necessário a quantificação de ovos nas fezes. Métodos utilizados para detecção de ovos nas fezes incluem o método de Ritchie e o de contagem de ovos por gramas de fezes (OPG), em câmara de MacMaster. Entretanto, para modelos experimentais de roedores, estes métodos têm demonstrado resultados insatisfatórios, devido à dificuldade de coletas individuais e obtenção da quantidade necessária de fezes, impossibilitando análises estatísticas. Uma alternativa para a contagem de ovos seria a de obtenção dos ovos diretamente das fêmeas mantidas em cultura. Portanto, este estudo teve como objetivo comparar a utilização das soluções PBS e RPMI-1640 para manutenção de Ancylostoma ceylanicum em cultura por 24 horas para avaliar a ovoposição e fertilidade das fêmeas. Os vermes foram obtidos de 12 hamsters previamente infectados com 50 larvas de A. ceylanicum. Cada conjunto de vermes foi transferido para uma placa de cultura (6 poços contendo PBS e 6 contendo RPMI)e a placa incubada por 24 horas a 37°C. Após este período, realizou-se a separação e contagem de machos e fêmeas, o sobrenadante foi coletado e centrifugado (10000x g / 10 minutos), sendo desprezado e acrescentado 500 µL de formol no pellet para contagem de ovos ao microscópio óptico. Para o resultado de fertilidade o número total de ovos de cada poço foi dividido pelo número de fêmeas. Não houve diferença significativa entre o número de ovos postos por fêmeas nas duas soluções usadas. Portanto, tendo em vista que o PBS é uma solução de custo mais acessível, ele se mostra como o método de escolha a ser utilizado como meio de cultura para avaliação da ovoposição em 24 horas.
