DISTRIBUI��O TECIDUAL DE DNA DE NEOSPORA CANINUM EM GERBILOS PARA MODELO EXPERIMENTAL DE NEOSPOROSE CR�NICA
Autor(es): ALFREDO SKREBSKY CEZAR, GUSTAVO TOSCAN, AUGUSTO WEBER, GABRIEL RIBAS PEREIRA, �GUEDA PALMIRA CASTAGNA DE VARGAS, LU�S ANT�NIO SANGIONI, FERNANDA SILVEIRA FLORES VOGEL, PAULO BAYARD DIAS GON�ALVES |
A caracteriza��o do modelo experimental de neosporose cr�nica em gerbilos (Meriones unguiculatus) � importante para estudos de patogenia e medidas de controle da neosporose em portadores cr�nicos. Este estudo visou: (1) caracterizar morbidade, sinais cl�nicos e mortalidade em gerbilos f�meas infectadas com diferentes doses de taquizo�tos de N. caninum; (2) mapear a distribui��o do parasita nos tecidos; (3) avaliar a PCR em tempo real, utilizando sonda TaqMan altamente sens�vel, para detec��o de DNA de N. caninum no sistema nervoso central (SNC) de portadores cr�nicos. As doses de taquizo�tos (cepa NC-1) inoculados intraperitonealmente foram: 5x104 (n=9); 5x103 (n=8); 5x102 (n=10). Sinais cl�nicos de neosporose cerebral foram avaliados diariamente: prostra��o, pelo eri�ado, anorexia, incha�o abdominal, cabe�a inclinada, incoordena��o motora, fraqueza/paralisia de membros anteriores, movimentos circulares; al�m de sinais como fraqueza/paralisia dos membros p�lvicos e ataxia. Procedeu-se eutan�sia dos animais in extremis ou 60 dias p�s-infec��o. Amostras de DNA extra�das de SNC, cora��o, pulm�es, f�gado, ba�o e rins foram submetidas a PCR (primers para amplifica��o de fragmento do gene Nc-5). Amostras de DNA de tecidos do SNC foram submetidas a PCR em tempo real com sonda TaqMan. A mortalidade aguda foi de 56%, 37% e 30%; a morbidade foi de 100%, 100% e 50%; a frequ�ncia de detec��o de DNA de N. caninum no SNC foi de 75%, 83% e 20%, utilizando sonda TaqMan, para as doses de 5x104, 5x103 e 5x102 taquizo�tos, respectivamente. A frequ�ncia de detec��o de DNA de N. caninum nos animais que sucumbiram � neosporose aguda foi: rins>pulm�es=ba�o>f�gado>cora��o, considerando os tr�s grupos experimentais. Conclui-se que a dose de 5x103 taquizo�tos foi mais adequada para induzir neosporose cr�nica. A distribui��o sist�mica de DNA do parasita esteve associada � fase aguda da doen�a. Na fase cr�nica, DNA do parasita foi detectado no SNC por PCR em tempo real. |