ANAIS 2014

DISTRIBUIÇÃO TECIDUAL DE DNA DE NEOSPORA CANINUM EM GERBILOS PARA MODELO EXPERIMENTAL DE NEOSPOROSE CRÔNICA Autor(es): ALFREDO SKREBSKY CEZAR, GUSTAVO TOSCAN, AUGUSTO WEBER, GABRIEL RIBAS PEREIRA, ÁGUEDA PALMIRA CASTAGNA DE VARGAS, LUÍS ANTÔNIO SANGIONI, FERNANDA SILVEIRA FLORES VOGEL, PAULO BAYARD DIAS GONÇALVES

DISTRIBUIçãO TECIDUAL DE DNA DE NEOSPORA CANINUM EM GERBILOS PARA MODELO EXPERIMENTAL DE NEOSPOROSE CRôNICA

» Á�rea de pesquisa: PROTOZOOLOGIA

» Instituição: UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA - UFSM

» Agência de fomento e patrocinadores: CAPES, CNPq, FAPERGS

A caracterização do modelo experimental de neosporose crônica em gerbilos (Meriones unguiculatus) é importante para estudos de patogenia e medidas de controle da neosporose em portadores crônicos. Este estudo visou: (1) caracterizar morbidade, sinais clínicos e mortalidade em gerbilos fêmeas infectadas com diferentes doses de taquizoítos de N. caninum; (2) mapear a distribuição do parasita nos tecidos; (3) avaliar a PCR em tempo real, utilizando sonda TaqMan altamente sensível, para detecção de DNA de N. caninum no sistema nervoso central (SNC) de portadores crônicos. As doses de taquizoítos (cepa NC-1) inoculados intraperitonealmente foram: 5x104 (n=9); 5x103 (n=8); 5x102 (n=10). Sinais clínicos de neosporose cerebral foram avaliados diariamente: prostração, pelo eriçado, anorexia, inchaço abdominal, cabeça inclinada, incoordenação motora, fraqueza/paralisia de membros anteriores, movimentos circulares; além de sinais como fraqueza/paralisia dos membros pélvicos e ataxia. Procedeu-se eutanásia dos animais in extremis ou 60 dias pós-infecção. Amostras de DNA extraídas de SNC, coração, pulmões, fígado, baço e rins foram submetidas a PCR (primers para amplificação de fragmento do gene Nc-5). Amostras de DNA de tecidos do SNC foram submetidas a PCR em tempo real com sonda TaqMan. A mortalidade aguda foi de 56%, 37% e 30%; a morbidade foi de 100%, 100% e 50%; a frequência de detecção de DNA de N. caninum no SNC foi de 75%, 83% e 20%, utilizando sonda TaqMan, para as doses de 5x104, 5x103 e 5x102 taquizoítos, respectivamente. A frequência de detecção de DNA de N. caninum nos animais que sucumbiram à neosporose aguda foi: rins>pulmões=baço>fígado>coração, considerando os três grupos experimentais. Conclui-se que a dose de 5x103 taquizoítos foi mais adequada para induzir neosporose crônica. A distribuição sistêmica de DNA do parasita esteve associada à fase aguda da doença. Na fase crônica, DNA do parasita foi detectado no SNC por PCR em tempo real.