DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE EHRLICHIA CANIS EM CÃES DOMÉSTICOS DA REGIÃO OCIDENTAL DE CUBA.
Autor(es): Matheus Dias Cordeiro, Maylin González Navarrete, Danny Pérez Pérez, Marcus Sandes Pires, Mario Márquez Álvarez, Adivaldo Henrique da Fonseca, Eugenio Roque López
DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE EHRLICHIA CANIS EM CÃES DOMÉSTICOS DA REGIÃO OCIDENTAL DE CUBA.
» Área de pesquisa: DOENÇAS VETORIAIS
» Instituição: UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO
» Agência de fomento e patrocinadores: CNPq, Capes e FAPERJ
Erliquiose monocítica canina é uma enfermidade distribuída mundialmente e endêmica principalmente nas áreas urbanas, onde é encontrado em larga escala o vetor Rhipicephalus sanguineus. A infecção em um cão sadio se dá no momento do repasto sanguíneo de um carrapato infectado pela bactéria Ehrlichia canis. Em Cuba esta bactéria ainda não foi diagnosticada por meio de ferramentas moleculares. O objetivo do presente estudo foi realizar a detecção molecular de E. canis em amostras de sangue de cães de três municípios da região ocidental de Cuba por meio da Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR). Foram coletadas 92 amostras de sangue oriundas de cães, escolhidos aleatoriamente, de três municípios da província de La Habana (Cotorro, Habana del Leste e Boyeros). Foi realizada uma PCR quantitativa (qPCR) para o diagnóstico de Ehrlichia spp. Para a determinação da espécie foi realizada uma Nested PCR, na qual um par de oligonucleotídeos iniciadores (ECC/ECB), que amplificam um fragmento específico do gene 16S rRNA do parasita investigado foi utilizado na primeira reação. Para a segunda reação, um par de primers foi utilizado para amplificar uma sequência específica de E. canis (ECAN5/HE3). Os resultados demonstraram que dos 92 animais investigados 34 (36,9 %) foram positivos para E. canis, com uma prevalência de 41,3% (19/46) no município de Boyeros, 40% (8/20) em Cotorro e 29,3% (7/26) em Havana del Leste. Não houve diferença significativa entre os valores de prevalência dos municípios de Boyeros e Cotorro, porém foram significativamente maiores que o valor encontrado no município de Havana del Leste (p<0.05). Dos 34 amplicóns detectados, cinco foram submetidos à reação de sequenciamento pelo método Sanger, sendo observados 100% de identidade com a espécie E. canis, quando comparadas com amostras depositadas no GenBank. O estudo permitiu o primeiro diagnóstico molecular de E. canis em cães em Cuba.
