IDENTIFICAÇÃO DE ANTÍGENOS DE TRYPANOSOMA VIVAX EM PLASMA SEMINAL DE BOVINOS PÚBERES EXPERIMENTALMENTE INFECTADOS
Autor(es): Dênia Monteiro de Moura, André Belico Vasconcelos, Luiz Flavio Nepomuceno do Nascimento, Paula Boeira Bassi, Monique Gomes Salles Tiburcio, Guilherme Caetano Garcia, Eustáquio Reseende Bittar, Joely Ferreira Figueiredo Bittar |
| Trypanosoma (Duttonela) vivax em machos é apontado como responsável por causar alterações reprodutivas como a redução da libido e da qualidade espermática além de lesões testiculares e epididimárias. Objetivando detectar antígenos de T.vivax no plasma seminal de bovinos, sete animais, negativos para T. vivax nos exames IFI, PCR e Buffy coat foram utilizados. Destes quatro foram infectados experimentalmente com 2x106 tripomastigotas de T. vivax/mL (GI) e três utilizados como grupo controle (GC). Os animais do GI foram acompanhados em relação à parasitemia (BCT), e coleta de sêmen com eletroejaculador nos momentos 1, 15, 30, 45, 60, 75 e 90ºdpi. A parasitemia foi avaliada diariamente sendo detectada a partir do 6º dpi, atingindo o pico no 18º dpi e nos momentos 45 e 75ºdpi. Nos momentos 30, 60 e 90º dpi não se observou parasitemia. O GC não apresentou parasitemia. As amostras de plasma seminal destinadas a realização do Western blotting foram conservadas em inibidor de protease e água destilada 1:1 (-20º C) até o momento do uso. A identificação de antígenos de T.vivax no plasma seminal dos animais do GC e GI foi realizada utilizando soro hiperimune bovino (IgG anti T. vivax - 1:80) e conjugado anti bovino marcado com peroxidase® Sigma (1:2500). No GC cinco antígenos com peso molecular (PM) variando de 130,8 a 60,49 kDa foram identificados. No GI, na fase inicial da infecção (1º-15º dpi), os cinco antígenos protéicos identificados possuíam PM variando de 13,47 a 11,87 kDa e na fase crônica (30-90º dpi) 21 antígenos proteicos foram identificados com PM variando de 55,78 a 16,79 kDa e 11,51 a 8,95 kDa. Nesse contexto pode-se concluir que proteínas de T. vivax são detectadas a partir do 15º dpi e a expressão de antígenos proteicos de T. vivax no plasma seminal aumenta com a cronicidade da infecção. |
