UTILIDADE DA ENZIMA DE RESTRIÇÃO TSP451 PARA O DIAGNÓSTICO DE RESISTÊNCIA DO RHIPICEPHALUS.MICROPLUS A FIPRONIL
Autor(es): María Florencia Fontes Garré, Eleonor Castro Janer, Guilherme Marcondes Klafke, Margareth Delara Capurro, Teresinha Tizu Sato Schumaker
UTILIDADE DA ENZIMA DE RESTRIçãO TSP451 PARA O DIAGNóSTICO DE RESISTêNCIA DO RHIPICEPHALUS.MICROPLUS A FIPRONIL
» Área de pesquisa: ACAROLOGIA
» Instituição: Departamento de Parasitología. Facultad de Veterinaria-UDELAR. Montevideo, Uruguai .
» Agência de fomento e patrocinadores: FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de S.Paulo)
A resistência cruzada entre ciclodienos e fenilpirazoles foi observada em vários artrópodes.Estes praguicidas atuam no GABA.Há relatos de resistência cruzada entre lindano e fipronil determinada por bioensaios,em populações de Rhipicephalus microplus do Uruguai e do Brasil.Também foi identificada uma mutação de duas bases,coincidentemente sítio de restrição da enzima Tsp45I,no Rdl em populações australianas resistentes a dieldrin.O objetivo do trabalho foi usar esta enzima para o diagnóstico molecular de resistência do carrapato a fipronil.
Foi extraído o DNA de 234 teleóginas de populações do Uruguai e do Rio Grande do Sul resistentes(13) e suscetíveis(18) a fipronil através de bioensaios in vitro para fipronil.Foram usados primers franqueadores da região descrita para a mutação Rdl.Posterior a realização do PCR-RFLP, usou-se a enzima Tsp45I que cliva na região 5\' GTCAC 3\' em ausência da mutação (AC/CT).A mesma não clivou o fragmento de DNA de nenhum dos indivíduos testados.Também não foi observada a mutação no sequenciamento de 28 indivíduos de populações resistentes.
Antes de descartar a possibilidade do uso da enzima para o diagnóstico de resistência a fipronil, sugere-se estudar mais indivíduos resistentes,já que possivelmente a frequência alélica desta mutação específica seja muito baixa,ou ainda que possam existir outras mutações associadas.
