DETECÇÃO MOLECULAR DE CRYPTOSPORIDIUM SPP. EM ÁGUA EM PRAIAS ARTIFICIAIS DO LAGO ITAIPU, PARANÁ
Autor(es): SILVIA CRISTINA OSAKI, ALESSANDRA SNAK, FELIPE GUSTAVO GARCIA, LUCIANA WOLFRAN, PEDRO RODRIGO H. SOARES, MALLU JAGNOW SERENO, ERTON GOMES DA SILVA, MARCIA BENEDITA DE OLIVEIRA-SILVA
DETECçãO MOLECULAR DE CRYPTOSPORIDIUM SPP. EM áGUA EM PRAIAS ARTIFICIAIS DO LAGO ITAIPU, PARANá
» Área de pesquisa: PROTOZOOLOGIA
» Instituição: Universidade Federal do Paraná
» Agência de fomento e patrocinadores: FUNDAÇÃO ARAUCÁRIA
A criptosporidiose é uma importante zoonose que afeta todas as classes de animais, causando quadros de diarreia. A principal via de transmissão pela água ou alimentos contaminados. Os dados de ocorrência de contaminação ambiental, especialmente a água, por protozoários no Brasil são escassos. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi verificar a ocorrência de oocistos de Cryptosporidium em praias formadas pelo Lago de Itaipu na região Oeste do Paraná, utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR) como método de diagnóstico. Durante o período de julho de 2011 a junho 2012 amostras de água (10 litros) foram coletadas de oito praias artificiais (10 locais de colheita). As amostras foram colhidas em intervalos de três meses, com o intuito de se verificar a influência da sazonalidade na ocorrência do parasito, resultando num total de 40 amostras. As amostras foram filtradas utilizando membranas com porosidade de 0,7 µm. As membranas foram lavadas com PBST e o tampão de lise foi adicionado ao sedimento, seguido por 15 ciclos de congelamento/descongelamento e subsequente extração de DNA utilizando o kit comercial de Tissue ChargeSwitch Mini gDNA® . A PCR foi realizada utilizando iniciadores que amplificam a região de hiper -variada do 18SSU gene rRNA . Os produtos amplificados foram visualizados em gel de agarose a 1,6 % e fotodocumentadas . Das 40 amostras analisadas, apenas uma foi positiva. Os resultados demonstraram que apenas em um momento foi detectada a presença de Cryptosporidium spp. A amostra será enviada para a realização do sequenciamento para determinar a espécie envolvida e, consequentemente, da espécie animal hospedeira, com o objetivo de conhecer a fonte de contaminação da água de modo que medidas preventivas possam ser aplicadas, uma vez que o local é usado para recreação e um grande número de turistas que frequentam o local anualmente.
